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液相色谱柱在使用时有什么地方需要注意的?

  • 发布日期:2021-06-14      浏览次数:130
    •      液相色谱柱的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。
          液相色谱柱的注意事项:
          1、柱效和保护柱
          拿到一根新柱时,一定要先看其使说明,然后测柱效,定期检测柱效,保留在新色谱柱上得到的色谱图,并记录条件,定期检测仪器的谱带展宽。若应用于在线监测,应对色谱柱提供在线的物理保护和化学保护,例如采取安装在线过滤器,自装填料保护柱和预装保护柱等。在线过滤器的作用是防止颗粒在柱头累计,优点是基本不影响柱效,在需要高柱效的时候常用,常更换的消耗品是滤芯和垫圈保护柱的作用是防止柱子被化学污染。缺点是多数保护柱影响色谱柱的柱效,特别是在用微柱时,常用的是普通自装填料的保护柱。最近新出的一些保护柱例如Sentry-guard保护柱,它的特点是高质量、高效填料、增加分析柱效、对脏样品载荷能力大,能延长保护柱的寿命,手可拧紧接头,安装时不需要工具,省时省,可换芯式设计,能采用各种不同的填料,主要适用于非常脏非常复杂的样品本底,例如生化样品,环境样品和食品等,或者不想做太多的圃相萃取,不想降低柱效果等情况。
          2、清洗
          对所做的样品要有充分的了解,用对该样品洗脱能力最强的流动相清洗,对于硅胶柱,先用甲醇洗去极性杂质,然后用干燥的二氯甲烷和正庚烷100-20OraL依次活化,对于键和相柱,一般用甲醇一氯仿一甲醇一水依次冲洗,每种色谱柱有特定的清洗方法,一定要看其使用说明。
          3、存放
          存放前除去杂质和盐,采用合适的存放溶剂,避免色谱柱床的干枯,避免机械振动,防止细菌生长,注意存放的温度。
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